朱玉贤现代分子生物学考研视频资料
朱玉贤现代分子生物学考研视频资料！
（1）精讲教材核心考点。按照教材篇章结构，讲解教材的重难知识点。
（2）串讲名校考研真题。通过分析历年考研真题，梳理命题规律和特点，分析名校考研真题出题思路。
考虑到课时的需要以及相关知识点的难易程度，对于一些简单的、考试不易涉及的知识点，本课程不予以讲述或一带而过，故建议在学习本课程之前提前复习一遍教材。
吕俊鸟，北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学专业博士。在教学方面，主要讲授生物化学、分子生物学、细胞生物学等生物学专业课程，并多次进行自考、考研辅导等培训，参与编写生物类考研辅导书，具有丰富的讲课经验；在科研方面，参与教育部等多项国家重点项目或重大课题，具有扎实的理论基础基础和实践经验，发表数篇sci论文。
授课特点：思维逻辑清晰，讲解细致透彻，注重各知识点的融会贯通。
第1章绪论
第2章染色体与dna（1）
第2章染色体与dna（2）
第2章染色体与dna（3）
第3章生物信息的传递（上）（1）
第3章生物信息的传递（上）（2）
第3章生物信息的传递（上）（3）
第4章生物信息的传递（下）（1）
第4章生物信息的传递（下）（2）
第4章生物信息的传递（下）（3）
第4章生物信息的传递（下）（4）
第4章生物信息的传递（下）（5）
第5章分子生物学研究法（上）（1）
第5章分子生物学研究法（上）（2）
第6章分子生物学研究法（下）
第7章原核基因表达调控（1）
第7章原核基因表达调控（2）
第7章原核基因表达调控（3）
第8章真核生物基因表达调控（1）
第8章真核生物基因表达调控（2）
第8章真核生物基因表达调控（3）
朱玉贤现代分子生物学视频全套部分题目之一：
一、选择题
①测定蛋白质在dna上的结合部位的常见方法是（）。[中山大学2008研]
a.western印迹
b.pcr
c.限制性图谱分析
d.dnase i保护足印分析
【答案】d
朱玉贤现代分子生物学视频全套参考：a项，westerm印迹是指将蛋白质经凝胶电泳转移到固相载体上，利用抗体检测目的蛋白的方法。b项，pcr是体外放大扩增特定的dna片段的分子生物学技术。c项，限制性图谱分析是对同一dna用不同的限制酶进行切割，从而获得各种限制酶的切割位点，由此建立的位点图谱有助于对dna的结构进行分析。d项，dnasei保护足印分析可检测rna聚合酶等蛋白质在dna上的结合位点，它不仅能找到与特异性dna结合的目标蛋白，而且能确认目标蛋白结合碱基部位的位置。因此答案选d。
朱玉贤现代分子生物学视频全套部分题目之二：
2②研究promoter dna与蛋白质及rna聚合酶分子之间相互作用不适合的方法是（）。
[中国科学技术大学2005研]
a.dna footprinting b.dna fingerprinting c.gel mobility assay（gel shift assay）
d.run off transcription
【答案】b
朱玉贤现代分子生物学视频全套参考：a项，dna footprinting即dna足迹试验，可检测蛋白质在dna上的结合位点，找到与特异性dna结合的目标蛋白，并确认目标蛋白结合在哪些碱基部位。b项，dna fingerprinting即dna指纹印迹，用于研究dna序列之间的相似性。c项，gel mobility assay（gel shift assay）即凝胶阻滞试验，又称dna迁移率变化试验，是体外分析dna与蛋白质相互作用的一种特殊的凝胶电泳技术。d项，run off transcription即延续转录，是检测启动子强度和转录起始位点的分子生物学实验方法，主要是rna聚合酶与模板的结合作用。
因此答案选b。
三、判断题
①western杂交的对象是蛋白质。（）[场州大学2018研]
【答案】对
②sds-page时，不同大小蛋白质分子的电荷/质量比值趋近于相同。（）[中山大学2009研]
【答案】对
朱玉贤现代分子生物学视频全套参考：sds与蛋白质结合带来两个后果：①由于sds是阴离子，使多肽链覆盖上相同的负电荷，该电荷量远超过蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同蛋白质间原有的电荷差别，使所有的sds-蛋白复合体电泳时以同样的电荷/蛋白质质量比向正极移动。②改变了蛋白质单体分子的构象。因此在sds-page中，所有蛋白质分子的电荷/质量比值基本相同，迁移速率只和蛋白质的分子大小有关。
四、名词解释题
1]基因组编辑技术[安徽师范大学2018研]
朱玉贤现代分子生物学视频全套参考：基因组编辑技术是一种可以在基因组水平上对dna序列进行改造的遗传操作技术。通常可在基因组水平上对目的基因序列甚至是单个核苷酸进行替换、删除，增加或插入外源dna序列。基因编辑技术中，zfn和talen为代表的序列特异性核酸酶技术能够高效率地进行定点基因组编辑，而crispr/cas9系统作为最新一代基因编辑技术，能够简便高效地实现基因组精确修饰。
五、简答题
①简述免疫共沉淀的概念，原理和优缺点。[中国科学院研究生院2013]
朱玉贤现代分子生物学视频全套参考：（1）免疫共沉淀的概念
免疫共沉淀是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，该方法能确定两种蛋白质在完整细胞内的生理性相互作用。
（2）免疫共沉淀的原理
若两个蛋白能够发生特异性相互作用，那么当用靶蛋白的抗体进行免疫沉淀时，另一个蛋白也会被同时沉淀下来。
（3）免疫共沉淀的优缺点
①优点
a.相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的，处于天然状态；
b.蛋白的相互作用是在自然状态下进行的，可以避免人为的影响；
c.可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。
②缺点
a.灵敏度不高，可能检测不到低亲和力的和瞬间的蛋白质-蛋白质相互作用；
b.两种蛋白质的结合可能不是直接结合，可能有第三者在中间起桥梁作用；
c.必须在实验前预测目的蛋白是什么，以选择最后检测的抗体，所以若预测不正确，实验就得不到结果，该方法本身具有冒险性
朱玉贤现代分子生物学视频全套部分题目之五：
③简述酵母双杂交的原理及应用。[河北大学2012研]
相关试题：酵母双杂交原理是什么？可以应用于哪些方面的研究？[电子科技大学2009研]
朱玉贤现代分子生物学视频全套参考：
（1）酵母双杂交的原理
①转录激活因子在结构上是组件式的，即这些因子往往由两个或两个以上相互独立的结构域构成，包括dna结合结构域（bd）和转录激活结构域（ad），bd和ad是转录激活因子发挥功能所必需的，且二者互相独立，功能互不影响。单独的bd能与特定基因的启动区结合，但不能激活基因的转录，需要和ad结合形成杂蛋白以后，才发挥完整的转录激活活性，使下游基因得以转录。
②将两个待研究的蛋白（x、y）分别与质粒的bd、ad结构域融合（bd-x表达诱饵蛋白，通常诱饵蛋白为已知蛋白；ad-y是猎物，猎物可以为cdna文库、基因片段或基因突变体等），将构建好的两个质粒转入同一酵母细胞中表达，若两蛋白之间不存在相互作用，则下游基因（报告基因）不会表达；若两蛋白之间存在相互作用，则bd与ad在空间上很接近，报告基因得以表达。通过报告基因表达与否来判断两蛋白之间是否存在相互作用。
（2）酵母双杂交的应用
①用于研究蛋白质与蛋白质之间的相互作用。
②用于发现新的蛋白质和蛋白质的新功能。
③用于在细胞体内研究抗原和抗体的相互作用。
④用于疾病发生机制的研究和药物的开发。
⑤用于建立基因组蛋白连锁图。
⑥用于确定蛋白质相互作用的结构域或活性位点。
原核基因表达调控的主要特点
（1）操纵子的调控
原核基因一般通过操纵子机制来实现基因表达调控，如乳糖操纵子、色氨酸操纵子以及阿拉伯糖操纵子等。
①乳糖操纵子是负控诱导系统。②色氨酸操纵子是负控阻遏系统。
（2）转录起始阶段的调控
转录起始是基因表达调控的关键环节。
（3）转录终止阶段的调控
该阶段的调控一般包括抗终止作用和弱化作用。抗终止因子是指能够阻止转录终止的蛋白。通常在终止子上游具有抗终止子作用信号。
（4）转录后调控
原核生物转录后调控主要是指在翻译或者翻译后水平上进行“微调”，主要包括mrna自身结构元件对翻译起始的调节、反义rna对翻译的调控、稀有密码子对翻译的影响以及翻译阻遏等现象。
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